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鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶3种基质对角膜上皮细胞增殖的影响:目的探讨鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶3种基质对体外培养角膜上皮细胞增殖的影响。方法采用鼠尾胶原、多聚赖氨酸和明胶作为基质包被培养器皿,以普通培养器皿作对照,培养角膜上皮细胞,观察细胞形态,进行细胞计数并描绘细胞生长曲线,比较不同基质对角膜上皮细胞的增殖作用。结果使用基质包被的培养器皿培养角膜上皮细胞,细胞增殖速度较普通组快,细胞形态、活力和长势比普通组更佳,促进增殖的能力为鼠尾胶原多聚赖氨酸明胶。结论鼠尾胶原可促进角膜上皮细胞增殖,且增殖效果优于多聚赖氨酸和明胶。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后,转移到培养箱内。济南鼠尾胶原厂家直销

鼠尾Ⅰ型胶原:组装液的配置:1.50mmol/L甘氨酸+200mmol/L氯化钾100mL,用1mol/L氢氧化钠调节酸碱度至9.2。2.胶原纤维的重构吸取胶原10μL至小培养皿中,倒入0.5mL自组装液,室温放置20min。予自组装液自组装24h。吸取0.05%戊二醛2mL至小培养皿中,将自组装24h的胶原浸泡在戊二醛中。然后将胶原经去离子水、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后进行TEM观察。3.生物矿化形成仿生骨材料静滴配置钙磷矿化液将25mL钙液(10mmol/L二水氯化钙+150mmol/L氯化钠+50mmol/L三羟甲基氨基甲烷+0.02%三氮化钠)倒入烧杯中,滴入聚丙烯(PAA)至浓度350μg/mL;滴加1mol/L的氯化氢,调节酸碱度至7.4,然后缓慢滴入25mL磷液(6mmol/L磷酸氢二钠),约16滴/min。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。长沙鼠尾胶原平均价格本品可用于细胞培养皿的包被,特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养。

含细胞三维胶原凝胶的制备(以配制1mg/mL三维胶1mL为例)准备好悬浮于培养液的细胞,并放置于冰浴中。将200μL本品加到12μL0.1mol/LNaOH中(如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。再加入23μL10×PBS或10×培养液,混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH为7左右,如果PBS或培养液中没有加酚红,初次使用时需要测定pH值)。加入760μL的细胞悬浮液,混匀后立即加到培养器皿中。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后,加入适当体积的细胞培养液,转移到培养箱中培养。本品在室温下pH中性时可迅速成胶,在操作过程中要尽量保持低温。保存条件4℃保存,切勿冻存,有效期一年。
除了让细胞更好贴上去,鼠尾胶原蛋白还能用于制备三维胶,这样可以在培养皿中一定程度上模拟身体内部的生长环境,让细胞在更真实地条件下进行生长。当然,除了这些,耗子尾汁还能做到很多事情,只需要打开网站——知网,输入鼠尾胶原蛋白就能看到,例如鼠尾胶原蛋白可用于制备防皱保湿或美白产品,制作止血海绵敷料等各种用途。NO.3鼠尾DNA除了从整条鼠尾中提取的鼠尾胶原蛋白,老鼠的尾巴尖尖也是制备「耗子尾汁」的好材料。这类「耗子尾汁」通常用来鉴别耗子的基因型,对于转基因小鼠而言,如果无法通过毛色来分辨动物的基因型,往往会选用经典的PCR法。手持尾巴,用止血钳夹住鼠尾的较高,折断尾骨后拉出尾腱。

鼠尾胶原,10mg包装,配制方法如下:1.配0.1M的乙酸溶液100ml。即取575ul冰乙酸加超纯水至100ml,容量瓶配制比较准确。2.用吸管吸取10ml刚配好的0.1M乙酸溶液(不要用*加,吸十次不如加一次z准确),加入盛胶原的瓶中,轻轻颠倒,不要震荡,蛋白容易起泡。几分钟即可,蛋白质非常好溶解。3.将胶原溶液移入事先压好的玻璃瓶中,比青霉素瓶大点的就行。用*在瓶底加1ml氯仿,打到一档就行,避免加入气泡。然后4度过夜除菌。4.第二天将上层胶原溶液分装进EP管中。用封口膜封口,4度保存,勿冷冻。制备鼠尾胶原:摇晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置一星期。温州正规鼠尾胶原进货价
放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培养瓶之中。济南鼠尾胶原厂家直销
利用鼠尾Ⅰ型胶原构建与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料。方法通过醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型胶原蛋白,并重构成胶原纤维。然后,将重构后的胶原纤维放置在矿化液中模仿骨生物矿化2~6d,通过透射电子显微镜和电子衍射观察骨生物矿化。结果酸解提取的鼠尾Ⅰ型胶原蛋白能够重构成胶原纤维,并且具有特征性的D-Band结构。透射电子显微镜和电子衍射显示:矿化2d后,羟基磷灰石钙前体渗入胶原纤维,胶原纤维部分矿化;矿化6d后,胶原纤维内部完全矿化,形成Ⅰ型胶原蛋白/羟基磷灰石钙的仿生骨材料。结论利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型胶原蛋白可以重构成胶原纤维,经矿化可形成与人类自体骨组织化学成分和分子结构一致的仿生骨材料。济南鼠尾胶原厂家直销
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